
工作人員在生物安全櫃內使用熒光定量PCR檢測試劑進行出血熱檢測。
人民網寧波10月16日電 (陳怡、徐柏偉)寧波作為浙江第一個外貿超千億美元的城市,每年都有大量的出入境人員、交通工具和貨物進出於各口岸,傳染病跨境傳播風險也日益加大。記者日前來到大榭口岸,現場目擊了口岸檢驗檢疫人員檢測鼠類樣品全過程。
2011年3月,大榭港區創建國際衛生港口順利通過世衛組織的驗收考核,正式成為全國第五個、浙江第一個國際衛生港口。大榭出入境檢驗檢疫局公共衛生實驗室被確立為寧波出入境檢驗檢疫局鼠傳疾病檢測實驗室,承擔寧波各口岸的檢獲鼠類樣品的種類鑒定和病原體檢測任務。
據介紹,鼠傳疾病的檢測是一個系統工程,包括鼠種類的鑒定、寄生虫的分離、解剖、病毒的分離提取、檢測和分析等一系列工作。
進入實驗室之前,程序非常嚴格。捂得嚴嚴實實的白大褂與口罩,經過嚴格消毒的橡膠手套……一切都顯得不平常。
記者旁觀了專業人員檢測鼠類的全過程:當鼠類樣本被送到實驗室時,實驗室人員全面進入檢疫鼠類樣本的狀態,實驗人員將鼠類樣品移運至具有P2+生物安全級別的媒介實驗室,在做好自身生物安全防護以后,將用乙醚麻醉處死后的鼠樣品擺放到解剖台上,測量體長、尾長、耳高、后足長、毛色等數據特征用於鼠種鑒定﹔接著實驗人員又用梳篦和牙刷對每個大鼠的腋下、鼠蹊部進行嚴密的篩查,檢查是否有蜱、蚤、?等寄生虫。在無菌條件下取出肺、肝、腎等組織組織樣本,同時,將鼠頭剪取后,高溫煮沸后分離頭骨,用於進一步的鼠種鑒定。
隨后,實驗人員在二級生物安全櫃內,提取組織樣品中存在的病毒核酸。身著生物安全防護服的工作人員坐在生物安全櫃內進行細致的操作,小心地剪取一塊塊組織樣本,加入緩沖液和氧化鋯珠,將放入樣本的適配器安裝到組織研磨儀進行研磨。通過加樣、洗脫,一步步嚴格的操作,完成了病毒RNA的提取。將提取好病毒RNA,加入到實驗室自行研發漢坦病毒屬篩查試劑,再放入設置好程序PCR儀內,進行擴增反應。
3個小時后,漢坦病毒的粗篩結果就出來了,顯示為漢坦病毒屬的特征條帶。隨后再用能夠對漢坦病毒屬內漢灘病毒和漢城病毒的分型的熒光定量PCR試劑進行復核和分型,檢測結果最終表明所檢獲的病毒屬於漢城型的漢坦病毒。為了更好的掌握該病毒的來源、變異情況,實驗室工作人員進一步對檢測到的病毒進行了基因序列分析和分子溯源,明確了該病毒是國內流行的引發人感染流行性出血熱的病毒。
實驗室主任告訴記者,醫學媒介生物(簡稱“病媒”生物)主要包括蚊子、蒼蠅、蟑螂、老鼠、跳蚤、蜱虫、?虫等。由病媒生物傳播的疾病主要有鼠疫、流行性出血熱、瘧疾、登革熱、流行性乙腦等。其中鼠類為口岸進境檢疫病媒生物中的重點檢疫對象,它是很多疾病的貯存宿主或媒介,目前已知的可向人類傳播的疾病有鼠疫、流行性出血熱、鉤端螺旋體、斑疹傷寒、蜱性回歸熱等57種。
近日,該實驗室對港區媒介監測送檢2隻鼠類樣本進行病原體檢測,檢出流行性出血熱病毒。這是該實驗室近年來首次在大榭口岸區域內檢測到鼠類攜帶該傳染病原體。
據了解,實驗室從2007年開展即投入醫學媒介攜帶傳染病病原體的檢測,曾檢獲全國首例輸入性鼠疫陽性的鼠類樣品,得到過國家質檢總局的通報表彰。
目前,實驗室已開展鼠類相關的20多項病原體檢測項目,其中鼠疫、漢坦病毒 、漢城病毒、鉤端螺旋體、森林腦炎等8個項目已經通過CNAS(中國合格評定國家認可委員會)認可。
據統計,2014年以來,該實驗室共檢測大榭、梅山等口岸送檢鼠類樣品共69份,檢測項目345項次,其中檢出流行性出血熱病毒陽性3例、新型沙粒病毒陽性12例、鉤端螺旋體陽性1例,同時還檢出多例樣品攜帶木糖葡萄球菌、大腸杆菌等致病菌。
據了解,近年來,寧波大榭出入境檢驗檢疫局在防控重大傳染病傳入及外來有害生物入侵方面取得了多個“首次”:全國首次截獲地中海兵豆象,檢出全國海港口岸首例甲型H1N1流感確診病例,檢出全國首次入境集裝箱鼠類鼠疫杆菌陽性,首次在浙江口岸截獲板齒鼠等。

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